Brucella IgM ELISA RUO

Un inmunoensayo enzimático para la determinación cualitativa y semicuantitativa de anticuerpos de clase IgM contra Brucella en suero y plasma. El kit DRG Brucella IgM ELISA es un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) de fase sólida. Las muestras de los pacientes se diluyen con diluyente de muestra y, además, se incuban con IgG-RF-Sorbent, que contiene anticuerpos de clase IgG antihumanos hiperinmunes para eliminar la inhibición competitiva. de IgG específicas y para eliminar los factores reumatoides. Este pretratamiento evita resultados falsos negativos o falsos positivos. Los pocillos de microtitulación como fase sólida se recubren con antígeno de Brucella abortus inactivado de la cepa S99-Weybridge. Las muestras de pacientes diluidas y los controles listos para usar se pipetean en estos pocillos. Durante la incubación, los anticuerpos específicos de Brucella de muestras y controles positivos se unen a los antígenos inmovilizados. Después de un paso de lavado para eliminar la muestra no unida y el material de control, se dispensan anticuerpos IgM anti-humanos conjugados con peroxidasa de rábano picante en los pocillos. Durante una segunda incubación, este conjugado anti-IgM se une específicamente a los anticuerpos IgM, lo que da como resultado la formación de inmunocomplejos ligados a enzimas. Después de un segundo paso de lavado para eliminar el conjugado no unido, los inmunocomplejos formados (en caso de resultados positivos) se detectan mediante incubación con sustrato TMB y el desarrollo de un color azul. El color azul se vuelve amarillo al detener la reacción del indicador enzimático con ácido sulfúrico. La intensidad de este color es directamente proporcional a la cantidad de anticuerpos IgM específicos de Brucella en la muestra del paciente. Se lee la absorbancia a 450 nm utilizando un lector de placas de microtitulación ELISA.