ELISA IgG para Brucella

Un inmunoensayo enzimático para la determinación cualitativa y semicuantitativa de anticuerpos de clase IgG contra Brucella en suero y plasma. Brucella es una pequeña bacteria Gram-negativa (0,4-0,8 µm de diámetro y 0,4-3,0 µm de longitud) que no está flagelada ni forma esporas. Desde el descubrimiento de Brucella melitensis por Bruce en 1887, ha surgido un patrón cada vez más complejo de cepas y cada tipo tiene características epidemiológicas distintivas. Los organismos virulentos de Brucella pueden infectar células fagocíticas y no fagocíticas; los mecanismos de patogenia de la brucelosis en su especie huésped natural y en los seres humanos aún no se conocen por completo. En todo el mundo, la brucelosis sigue siendo una fuente importante de enfermedad en humanos y animales domésticos. Aunque la incidencia y la prevalencia notificadas de la enfermedad varían mucho de un país a otro (desde <0. 01 a >200 por 100.000 habitantes), la brucelosis bovina causada principalmente por B. abortus sigue siendo la forma más extendida. Los grupos de riesgo incluyen trabajadores de mataderos, inspectores de carnes, cuidadores de animales, veterinarios y técnicos de laboratorio. La brucelosis es una enfermedad de declaración obligatoria a nivel nacional y notificable a la autoridad sanitaria local. El kit DRG Brucella IgG ELISA es un ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA) en fase sólida. Los pocillos de microtitulación como fase sólida están recubiertos con antígeno Brucella abortus de la cepa S99-Weybridge. Las muestras de pacientes diluidas y los controles listos para usar se pipetean en estos pocillos. Durante la incubación, los anticuerpos específicos de Brucella de muestras y controles positivos se unen a los antígenos inmovilizados. Después de un paso de lavado para eliminar la muestra no unida y el material de control, se dispensan anticuerpos IgG antihumanos conjugados con peroxidasa de rábano picante en los pocillos. Durante una segunda incubación, este conjugado anti-IgG se une específicamente a los anticuerpos IgG, lo que da como resultado la formación de inmunocomplejos ligados a enzimas. Después de un segundo paso de lavado para eliminar el conjugado no unido, los inmunocomplejos formados (en caso de resultados positivos) se detectan mediante incubación con sustrato TMB y el desarrollo de un color azul. El color azul se vuelve amarillo al detener la reacción del indicador enzimático con ácido sulfúrico. La intensidad de este color es directamente proporcional a la cantidad de anticuerpos IgG específicos de Brucella en la muestra del paciente. Se lee la absorbancia a 450 nm utilizando un lector de placas de microtitulación ELISA. Durante una segunda incubación, este conjugado anti-IgG se une específicamente a los anticuerpos IgG, lo que da como resultado la formación de inmunocomplejos ligados a enzimas. Después de un segundo paso de lavado para eliminar el conjugado no unido, los inmunocomplejos formados (en caso de resultados positivos) se detectan mediante incubación con sustrato TMB y el desarrollo de un color azul. El color azul se vuelve amarillo al detener la reacción del indicador enzimático con ácido sulfúrico. La intensidad de este color es directamente proporcional a la cantidad de anticuerpos IgG específicos de Brucella en la muestra del paciente. Se lee la absorbancia a 450 nm utilizando un lector de placas de microtitulación ELISA. Durante una segunda incubación, este conjugado anti-IgG se une específicamente a los anticuerpos IgG, lo que da como resultado la formación de inmunocomplejos ligados a enzimas. Después de un segundo paso de lavado para eliminar el conjugado no unido, los inmunocomplejos formados (en caso de resultados positivos) se detectan mediante incubación con sustrato TMB y el desarrollo de un color azul. El color azul se vuelve amarillo al detener la reacción del indicador enzimático con ácido sulfúrico. La intensidad de este color es directamente proporcional a la cantidad de anticuerpos IgG específicos de Brucella en la muestra del paciente. Se lee la absorbancia a 450 nm utilizando un lector de placas de microtitulación ELISA. Después de un segundo paso de lavado para eliminar el conjugado no unido, los inmunocomplejos formados (en caso de resultados positivos) se detectan mediante incubación con sustrato TMB y el desarrollo de un color azul. El color azul se vuelve amarillo al detener la reacción del indicador enzimático con ácido sulfúrico. La intensidad de este color es directamente proporcional a la cantidad de anticuerpos IgG específicos de Brucella en la muestra del paciente. Se lee la absorbancia a 450 nm utilizando un lector de placas de microtitulación ELISA. Después de un segundo paso de lavado para eliminar el conjugado no unido, los inmunocomplejos formados (en caso de resultados positivos) se detectan mediante incubación con sustrato TMB y el desarrollo de un color azul. El color azul se vuelve amarillo al detener la reacción del indicador enzimático con ácido sulfúrico. La intensidad de este color es directamente proporcional a la cantidad de anticuerpos IgG específicos de Brucella en la muestra del paciente. Se lee la absorbancia a 450 nm utilizando un lector de placas de microtitulación ELISA.