Hormonas Tiroideas - ATM Importadora

ELISA antiperoxidasa antitiroidea (anti-TPO)

webmaster — Wed, 24 Jul 2024 14:12:51 +0000

Determinación cuantitativa de autoanticuerpos de peroxidasa tiroidea (TPO) en suero o plasma humano mediante un inmunoensayo enzimático en microplaca. Las mediciones de los autoanticuerpos TPO pueden ayudar en el diagnóstico de ciertas enfermedades de la tiroides, como las de Hashimoto y Grave, así como el bocio no tóxico. Se ha demostrado que los anticuerpos contra la peroxidasa tiroidea están presentes de manera característica en pacientes con tiroiditis de Hashimoto (95%), mieledema idiopático (90%) y enfermedad de Graves (80%)1. De hecho, el 72% de los pacientes positivos para anti-TPO presentan algún grado de disfunción tiroidea. Esto ha llevado a que la medición clínica se convierta en una herramienta valiosa en el diagnóstico de la disfunción tiroidea. En el pasado, las mediciones de anticuerpos contra la TPO se realizaban mediante hemaglutinación pasiva (PHA). Las pruebas de PHA no tienen la sensibilidad del inmunoensayo enzimático y están limitadas por la interpretación subjetiva. Este procedimiento, con la sensibilidad mejorada de la EIA, permite la detectabilidad de niveles subclínicos de anticuerpos contra TPO. Además, los resultados se cuantifican mediante un espectrofotómetro, lo que elimina la interpretación subjetiva. La metodología del inmunoensayo enzimático en microplacas proporciona al técnico una sensibilidad óptima y requiere pocas manipulaciones técnicas. En este método, primero se añade suero de referencia, muestra de paciente diluida o control a un pocillo de microplaca. Se añade antígeno de peroxidasa tiroidea biotinilada (TPO) y luego se mezclan los reactivos. La reacción resulta entre los autoanticuerpos contra TPO y la TPO biotinilada para formar un complejo inmunológico, que se deposita en la superficie de los pocillos recubiertos con estreptavidina a través de la reacción de alta afinidad de la biotina y la estreptavidina. Una vez completado el período de incubación requerido, la aspiración o decantación separa los reactivos que no están adheridos a los pocillos. Luego se agrega un conjugado de enzima anti-IgG humana para permitir la cuantificación de la reacción mediante la interacción con la IgG humana del complejo inmunológico. Después del lavado, la actividad enzimática se determina mediante la reacción con el sustrato para producir color. El empleo de varias referencias séricas de actividad de anticuerpos conocida permite la construcción de un gráfico de actividades enzimáticas y de anticuerpos. A partir de la comparación con la curva de respuesta a la dosis, la actividad enzimática de una muestra desconocida se puede correlacionar con el nivel de anticuerpos autoinmunes.

ELISA de TSH (ultrasensible)

webmaster — Wed, 24 Jul 2024 14:10:29 +0000

Un inmunoensayo enzimático para la determinación cuantitativa ultrasensible de la hormona estimulante de la tiroides (U-TSH) en suero. La determinación de los niveles séricos o plasmáticos de la hormona estimulante de la tiroides (TSH o tirotropina) se reconoce como una medida importante en la evaluación de la función tiroidea.1 La hormona estimulante de la tiroides es secretada por el lóbulo anterior de la glándula pituitaria e induce la producción y liberación de de tiroxina (T4) y triyodotironina (T3) de la glándula tiroides.2 Es una glicoproteína con un peso molecular de aproximadamente 28.000 daltons, que consta de dos subunidades químicamente diferentes, alfa y beta.3 Aunque la concentración de TSH en sangre es extremadamente bajo, es esencial para el mantenimiento de la función tiroidea normal. La liberación de TSH está regulada por una hormona liberadora de TSH (TRH) producida por el hipotálamo. Los niveles de TSH y TRH están inversamente relacionados con el nivel de hormona tiroidea. Cuando hay un nivel alto de hormona tiroidea en la sangre, el hipotálamo libera menos TRH, por lo que la pituitaria secreta menos TSH. La acción opuesta ocurrirá cuando haya niveles reducidos de hormonas tiroideas en la sangre. Este proceso, conocido como mecanismo de retroalimentación negativa, es responsable de mantener los niveles sanguíneos adecuados de estas hormonas.4,5 Los análisis de TSH convencionales se aceptan generalmente como una herramienta importante en el diagnóstico del hipotiroidismo primario y secundario1, pero ofrecen una utilidad clínica limitada en la evaluación del hipertiroidismo (tiroides hiperactiva) debido a una falta de sensibilidad. El ELISA de TSH ultrasensible (U-TSH) ofrece una sensibilidad de 0,05 µUI/mL y, por lo tanto, permite la discriminación entre poblaciones de pacientes hipertiroideos y normales. El ensayo está destinado a medir cuantitativamente la TSH en suero humano con sensibilidad de segunda generación. El U-TSH ELISA se puede utilizar como ayuda en la evaluación del estado de la tiroides y en el diagnóstico y tratamiento de enfermedades de la tiroides. La prueba ELISA de TSH ultrasensible se basa en el principio de un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas en fase sólida.6,7 El sistema de ensayo utiliza un anticuerpo monoclonal único dirigido contra un determinante antigénico distinto en la molécula de TSH intacta. El anticuerpo monoclonal de ratón anti-TSH se utiliza para la inmovilización en fase sólida (pocillos de microtitulación) y el anticuerpo anti-TSH de cabra se utiliza en la solución de conjugado anticuerpo-enzima (peroxidasa de rábano picante). Se deja que la muestra de prueba reaccione simultáneamente con los anticuerpos, lo que da como resultado que la molécula de TSH quede intercalada entre la fase sólida y los anticuerpos unidos a enzimas. Después de una incubación de 2 horas a temperatura ambiente con agitación, la fase sólida se lava con agua destilada para eliminar los anticuerpos marcados no unidos. Se añade una solución de tetrametilbencidina (TMB) y se incuba durante 20 minutos, lo que produce el desarrollo de un color azul. El desarrollo del color se detiene con la adición de HCl 1 N y el color amarillo resultante se mide espectrofotométricamente a 450 nm.La concentración de TSH es directamente proporcional a la intensidad del color de la muestra de prueba.

Anti - TG-AB Elisa

webmaster — Tue, 06 Jun 2023 20:21:15 +0000

La tiroglobulina humana (TG) altamente purificada se une a los micropocillos. Los anticuerpos contra este antigeno, si estan presentes en suero o plasma diluidos, se unen al antigeno respective. El lavado de los micropocillos elimina los componentes de suero y plasma no especificos no unidos. La lgG antihumana conjugada con peroxidasa de rabano picante (HRP) detecta inmunol6gicamente los anticuerpos unidos del paciente que forman un complejo conjugado/anticuerpo/antigeno.
El lavado de los micropocillos elimina el conjugado no unido. Un ustrato enzimatico en presencia de un conjugado unido se hidroliza para formar un color azul. La adici6n de un acido detiene la reacci6n formando n producto final amarillo. La intensidad de este color amarillo es prcional a la concentraci6n de anticuerpos lgG presentes en la muestra original

Triyodotironina (T3) ELISA

ATM importadora — Tue, 16 Nov 2021 04:19:19 +0000

Un inmunoensayo enzimatico para la determinaci6n cuantitativa de triyodotironina (T3) en suero .. La glandula tiroides y las hormonas asociadas son un componente importante del sistema endocrine. Ejercen influencias reguladoras poderosas y esenciales sabre el crecimiento, la diferenciaci6n, el metabolismo celular y el equilibria hormonal general del cuerpo, as, coma sabre el mantenimiento de la activ1dad metab61ica y el desarrollo de los sistemas óseo y organico.
se recubre en un pocillo de microtitulaci6n. Una cantidad medida de suero de! paciente, una cierta cantidad de anticuerpo monoclonal anti-T3 de rat6n y una cantidad constante de T3 conjugado con peroxidasa de rabano picante se agregan a los pocillos de microtitulaci6n. Durante la incubaci6n, el anticuerpo anti-T3 de rat6n se une al segundo anticuerpo en las pocillos. T3 y la enzima conjugada-T3 compiten par las sitios de uni6n limitados en el anticuerpo anti-T3. Despu8s de una incubaci6n de 60 minutes a temperatura ambiente, las pocillos se lavan 5 veces con agua para eliminar el conjugado T3 no unido. Luego se agrega una soluci6n de TMB y se incuba durante 20 minutes a temperatura ambiente, lo que da coma resultado el desarrollo de un color azul. El desarrollo del color se detiene con la adici6n de HCI 1N,intensidad del colorformado es proporcional a la cantidad de enzima presente calcula la concentraci6n de T3 en la muestra desconocida.7-11

Thyroxine / Tiroxina total (T4) ELISA

ATM importadora — Tue, 16 Nov 2021 04:16:55 +0000

Un inmunoensayo enzimatico para la determinaci6n cuantitativa de tiroxina total (T4) en suero. El anticuerpo contra T4 se recubre en una fase s61ida (pocillo de microtitulaci6n). Se agrega una cantidad medida de suero del paciente y una cantidad constante de T4 marcada con peroxidasa de rabano picante. Durante la incubaci6n, T4 en la muestra del paciente y T4 marcado con enzima compiten por los sitios de union limitados en el anticuerpo T4. Ia fase s61ida se lava con agua para eliminar T4 sin unir. Se agrega una soluci6n de tetrametilbencidina (TMB) dndo como resultado el desarrollo de un color azul. El desarrollo del color se detiene con a adici6n de HCI 1 N, y el color amarillo resultante se mide espectrofotometricamente La tensidad del color formado es proporcional a la cantidad de enzima presente y esta inversamente elacionada con la cantidad de T4 en la muestra del paciente. Lea la absorbancia a 450 nm

Hormona estimulante de la tiroides (TSH) ELISA

ATM importadora — Tue, 16 Nov 2021 04:15:53 +0000

Un inmunoensayo enzimatico para la determinaci6n cuantitativa de la hormona estimulante de la tiroides (TSH) en suero. La determinaci6n de los niveles sericos o plasmaticos de hormona estimulante de la tiroides (TSH o tirotropina) se reconoce como un metodo sensible en el diagn6stico de hipotiroidismo primario y secundario.El anti cuerpo anti-TSH monoclonal de rat6n se utiliza para la inmovilizaci6n en fase s6Iida (pocillos de microtitulaci6n) y el anticuerpo anti-TSH de cabra se encuentra en la soluci6n conjugada de anticuerpo-enzima. Se permite que la muestra de prueba reaccione simultaneamente con los dos anticuerpos, lo que da como resultado que las moleculas de TSH queden intercaladas entre la fase s6Iida y los anticuerpos ligados a enzimas. Despues de una incubaci6n de 60 minutos lo que da como resultado el desarrollo de un color azul. El desarrollo del color se detiene con la adici6n de HCI 1 N y el color amarillo resultante s La concentración de TSH es directamente proporcional a la intensidad del color de la muestra de prueba. resultando en el desarrollo de un color azul. El desarrollo del color se detiene con la adici6n de HCI 1 N yEI desarrollo del color se detiene con la adici6n de HCI 1 N y el color amarillo resultante se mide espectrofotometricamente a 450
nm. La concentraci6n de TSH es directamente proporcional a la intensidad del color de la muestra de prueba.